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本制品是抗Taq单克隆抗体和Taq DNA聚合酶的混合物，适用于Hot Start PCR。高温加热前，抗Taq单克隆抗体与Taq DNA聚合酶结合，抑制聚合酶的活性，从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已变性，因此无需热启动步骤，在常规PCR反应条件下即可使用。本制品适用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR、高GC含量（>60%），有二级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组扩增检测。

具有高特异性和灵敏度，稳定性强的优点，产品用途广泛。

• 高特异性PCR反应；
  
• 复杂模板扩增；
  
• Multiplex PCR；
  
• 基因组扩增检测；
  
• 荧光定量PCR。

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

组分	250U	1250U	5000U
热启动Taq DNA聚合酶(含Taq抗体，5U/μL)	50μL	50μL×5	1mL
5×HS Taq Buffer with Mg2+	1mL×2	1mL×10	40mL

保存：-20℃


20mM Tris-HCl(pH8.0)，100mM KCl，0.1mM EDTA，1mM DTT，0.5% Tween20，0.5% Nonidet P-40，50% Glycerol。


经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，经检测无核酸内、外切酶污染。


使用本试剂扩增得到的PCR产物3'端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T-vector中。

• 常用反应体系（50μL）：
  

  成分	用量
  5×HS Taq Buffer with Mg2+	10μL
  上游引物	0.2～1.0μM（终浓度）
  下游引物	0.2～1.0μM（终浓度）
  dNTPs (10mM each)	1μL
  模板	1～50ng（质粒） 10ng～1μg（基因组）
  热启动Taq DNA聚合酶(5U/μL)	0.25μL (1.25U)
  ddH2O	至50μL

• 常用PCR反应程序：
  
  • 两步法扩增程序：
    

    反应阶段	温度	时间	循环数
    预变性	94℃	1min	1
    变性	95℃	20s	35～40
    退火/延伸	60℃	根据产物长度调整

  • 三步法扩增程序：
    

    反应阶段	温度	时间	循环数
    预变性	94℃	1min	1
    变性	95℃	15s	35～40
    退火	50～60℃	20s
    延伸	72℃	根据产物长度调整

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